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Metodos de secuenciación de ADN
Secuenciar una molécula de ADN consiste en determinar en qué orden se disponen los cuatro nucleótidos (A, T, C y G) que componen la molécula. A partir de 1977 dos técnicas han sido utilizadas habitualmente para la secuenciación de moléculas largas de ADN, por una parte el método de Alan Maxan y Walter Gilbert de hidrólisis química especifica y por otra la de interrupción controlada con didesoxinucleótidos de Frederic Sanger. El método de degradación química (Maxam y Gilbert, 1977) En este método, un fragmento de ADN de cadena doble o sencilla se marca en los extremos 5´ o 3´ de una o ambas hebras con 32P. Después, la muestra de ADN se divide en cuatro alícuotas y se fragmenta en cuatro reacciones químicas distintas. Posteriormente, los fragmentos de ADN generados pueden ser separados por electroforesis en cuatro carriles distintos con base en su tamaño. Conociendo el nucleótido en el que se realizaron los cortes, se puede inferir la secuencia de la molécula original. L...
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